Les gélatinases sont un type de métalloprotéases matricielles dépendantes du zinc (MMP) qui dégradent les gélatines et une variété d'autres protéines de la matrice extracellulaire. Ces enzymes sont synthétisées sous forme de zymogènes latents qui sont activés par protéolyse et inhibés par les inhibiteurs tissulaires des métalloprotéases (TIMP). Deux gélatinases de mammifères, la gélatinase A (MMP-2) et la gélatinase B (MMP-9), sont essentielles à la dégradation de la membrane basale et sont fortement régulées positivement dans diverses cellules tumorales. L'activité de gélatinase est habituellement détectée par de petites analyses d'activité à base de peptides qui peuvent souffrir d'un manque de spécificité de substrat. D'autres procédés pour l'activité de la gélatinase comprennent la zymographie sur gélatine où les échantillons sont soumis à une électrophorèse sur une PAGE-SDS contenant de la gélatine, et renaturés en outre dans un tampon approprié pendant 12 à 16 h. Le zymogramme est ensuite coloré, et les zones de digestion apparaissent sous forme de bandes claires sur un fond coloré de façon sombre où le substrat a été dégradé par l'enzyme. De telles méthodes sont laborieuses, longues et peuvent conduire à la perte de l'activité enzymatique, car la renaturation peut ne pas être complètement réversible. La trousse d'analyse de l'activité de la gélatinase utilise une approche hybride pour la détection de l'activité gélatinase en utilisant un substrat de gélatine fortement trempé qui libère un fluorophore lors du clivage par une gélatinase appropriée, qui peut être facilement quantifié en utilisant un lecteur de microplaque classique. Cette méthode est spécifique au substrat, simple, rapide, à haut débit et adaptable à la détection sensible de l'activité gélatinase (aussi faible que 0,06 mCDU pour la collagénase bactérienne) dans des échantillons biologiques.
