L'analyse par chimiluminescence immuno-CLIA est née en 1977. Selon les principes de base du radioimmunoessai, une technique de chimiluminescence très sensible est combinée à une réponse immunitaire très spécifique pour établir un immunoessai par chimiluminescence. CLIA a les caractéristiques d'une sensibilité élevée, d'une forte spécificité, d'une large plage linéaire, d'un fonctionnement facile et ne nécessite pas d'équipement très coûteux. CLIA a une large gamme d'applications. Il peut détecter des antigènes, des haptènes et des anticorps de différentes tailles moléculaires, ainsi que des sondes d'acide nucléique. Comparé au radioimmunoessai (RIA), au dosage immunologique par fluorescence (IFA) et au dosage immunoenzymatique (EIA), CLIA présente les avantages de l'absence de rayonnement, d'une longue période de validité des marqueurs et d'une automatisation complète.
L'immunoessai par chimiluminescence contient deux systèmes: l'immunoessai et l'analyse par chimiluminescence. Le système de dosage immunologique utilise des substances chimioluminescentes ou des enzymes comme marqueurs, qui sont directement marqués sur des antigènes ou des anticorps, et réagissent avec des antigènes et des anticorps pour former des complexes immuns antigène-anticorps. Le système d'analyse par chimioluminescence ajoute un oxydant ou un substrat luminescent d'enzyme après la fin de la réaction immunitaire. La substance chimioluminescente est oxydée par l'oxydant pour former un intermédiaire excité, qui émet des photons pour libérer de l'énergie pour revenir à un état fondamental stable. L'intensité lumineuse peut être détectée par un instrument de mesure du signal lumineux. Selon la relation entre le marqueur de chimioluminescence et l'intensité de luminescence, la courbe standard peut être utilisée pour calculer le contenu de l'analyte.
L'immunoessai par chimioluminescence est un type de méthode d'immunoessai dans lequel les anticorps ou les antigènes sont directement marqués avec des réactifs de chimioluminescence. À l'heure actuelle, les marqueurs courants sont principalement des agents chimioluminescents à base de luminol et d'ester d'acridine.
1 Test immunologique par chimiluminescence du marqueur du luminol: La luminescence du luminol est la luminescence de réaction d'oxydation. Dans les solutions alcalines, le luminol peut être oxydé pour émettre de la lumière par de nombreux oxydants, dont H2O2 est le plus couramment utilisé. En raison de la vitesse lente de la réaction de luminescence, certaines enzymes ou catalyseurs inorganiques doivent être ajoutés. Les principales enzymes sont la peroxydase de raifort (HRP), et les enzymes inorganiques comprennent O3, halogène, Fe3, Cu2, Co2 et leurs complexes.
2 Test immunologique par chimioluminescence marqué avec des esters d'acridine: Les esters d'acridine sont utilisés dans CLIA en raison de leur mauvaise stabilité thermique, et un dérivé d'ester d'acridinium plus stable a été synthétisé après recherche. Dans les conditions de H2o2 et OH, les composés d'ester d'acridine peuvent émettre de la lumière rapidement avec un rendement quantique élevé. Par exemple, le rendement quantique en ester aromatique d'acridine peut atteindre 0,05. L'ester d'acridine est utilisé comme marqueur pour le dosage immunologique, et le système de luminescence est simple, rapide, pas besoin d'ajouter de catalyseur, et une efficacité de marquage élevée, un fond bas. Ces caractéristiques suscitent un grand intérêt de la majorité des analystes et des diagnostiqueurs.
