Le tris, ou tris(hydroxyméthyl)aminométhane, est largement utilisé comme tampon de pH dans les milieux biologiques depuis environ 35 ans. Les propriétés quasi idéales de ce tampon biologique sont la raison de sa popularité. Tris n'absorbe pas l'eau, est facilement soluble dans l'eau et a une grande pureté. Il ne précipite pas les sels de calcium, est stable en solution pendant plusieurs mois à température ambiante et ne semble pas inhiber de nombreux systèmes enzymatiques. Cependant, en raison des propriétés chimiques et physiques du tampon Tris, une mauvaise utilisation peut entraîner une mesure erronée du pH du système d'électrodes.
L'influence du pH dans le tampon TRIS sur l'électrode
Les biochimistes utilisent des tampons TRIS pour contrôler le pH dans la plage physiologique (environ 7 à 8 pH), car le phosphate peut provoquer des réactions indésirables avec les substances biologiques présentes dans l'échantillon à tester. Cependant, lorsque des mesures de pH doivent être effectuées sur ces solutions, un autre type de « réaction secondaire indésirable » doit être reconnu, impliquant le système d'électrodes de pH.
L'influence des propriétés chimiques et physiques du tampon Tris sur le pH
Le Tris, qui est couramment utilisé pour la mesure physiologique (pH 7 à 7,5), n'a pas une grande capacité tampon. Par conséquent, des précautions doivent être prises lors de l'utilisation d'un tampon tris pour contrôler le pH de l'échantillon. Le coefficient de température assez élevé du tris (-0,028pH/C) mérite également d'être pris en compte. Par exemple, si l'appareil est étalonné avec du tampon tris et que la température du tris est de 20 C, l'utilisation d'un pH de 25 C provoquera des erreurs. Par conséquent, la dépendance à la température et au pH doit être utilisée lors de l'utilisation de tris pour la normalisation. Lors de l'utilisation du tris pour contrôler le pH de l'échantillon, le degré de contrôle dépendra de la température de l'échantillon. Si la température de l'échantillon change de 2 C, le contrôle du pH change d'environ 0,06 unité de pH. Le contrôle du pH requis déterminera les fluctuations de température maximales admissibles.
Avantages du tampon Tris
Parce que la base Tris est hautement alcaline, ce système tampon peut être utilisé pour préparer des tampons avec une large gamme de valeurs de pH allant de l'acide à l'alcalin ;
Il interfère peu avec le processus biochimique et ne précipite pas avec les ions calcium, magnésium et métaux lourds.
Inconvénients du tampon Tris
La valeur du pH du tampon est fortement affectée par la concentration de la solution. Le tampon est dilué dix fois, et le changement de pH est supérieur à 0,1 ; le tampon Tris doit être préparé à partir de tris de haute pureté et de HCl en utilisant de l'eau distillée ou désionisée sans CO2.
L'effet de la température est important et le changement de température a une grande influence sur la valeur du pH du tampon, il doit donc être préparé à la température d'utilisation, et le tampon Tris-HCl préparé à température ambiante ne peut pas être utilisé à 0 C à 4 C;
Il est facile d'absorber le CO2 dans l'air, donc le tampon préparé doit être hermétiquement fermé ;
Ce tampon a un certain effet d'interférence sur certaines électrodes de pH, utilisez donc une électrode compatible avec la solution Tris.
