La structure et la fonction de la protéine doivent être maintenues dans un environnement de pH approprié. Par conséquent, le choix du tampon de pH est très important lors de la préparation et de la purification de la protéine. Seul un tampon approprié peut assurer l'activité et la stabilité structurelle de la protéine.
Effet du tampon dans le processus de purification des protéines
Il existe de nombreux types de tampons pour la purification des protéines. Tout en maintenant le pH du système, il est nécessaire de s'assurer que la protéine ne peut pas être inactivée pendant le processus de purification, ou de minimiser la quantité d'inactivation de protéine, qui doit être maintenue à chaque étape de purification de protéine. Solubilité et activité des protéines.
Exigences du tampon de purification des protéines
Le tampon dans le processus de purification des protéines doit non seulement empêcher la dégradation des protéines, mais également empêcher l'agrégation des protéines, ce qui a un impact significatif sur les résultats expérimentaux. Les facteurs suivants doivent être pris en compte lors de la sélection des tampons réactifs : pH, système tampon, ions de sel, agents réducteurs et stabilisants. Chacun de ces facteurs doit être optimisé en fonction de la protéine cible purifiée, et l'activité de la protéine cible doit être utilisée comme critère d'évaluation pour l'optimisation.
Comprendre les conditions de stabilité des protéines
Il existe de nombreux types de protéines et différentes protéines s'adaptent à différentes valeurs de pH. Le tampon doit être sélectionné en fonction de sa valeur de pH optimale. Dans de nombreux cas, le pH est de 7,4, ce qui est une condition biologique mimant, et la plupart des protéines sont stables à ce pH. Cependant, il existe quelques exceptions, qui nécessitent un ajustement du pH pour maintenir la protéine soluble et non dégradée.
Tampons couramment utilisés pour la purification des protéines
Les tampons couramment utilisés dans le processus de purification des protéines comprennent le Tris, la Tricine, le Bis-Tris, le MOPS, etc. Parmi eux, le Tris est couramment utilisé. Sa gamme tampon est proche du pH physiologique et a une faible force ionique. C'est un bon solvant pour les protéines. Peut assurer la stabilité de la protéine. Il est à noter que lors de la préparation du tampon, essayez d'éviter le point isoélectrique pl de la protéine cible. Parce que la protéine n'a pas de charge électrostatique à sa surface dans la solution de pH de son point isoélectrique, la force de répulsion entre les centaines de molécules est réduite, elle est facile à agréger et la solubilité est réduite.
Vous pouvez maintenant trouver la valeur de pH d'adaptation, le point isoélectrique et la plage de tampon du tampon à purifier, et vous pouvez l'adapter directement en fonction des exigences correspondantes. Notre société est un fabricant de réactifs de diagnostic in vitro, pouvant fournir des tampons pH en gros conditionnement tels que Tris, MOPS, Bicine, etc.
