Quelque chose à propos de l'ester d'acridinium (NSP-SA-NHS)
Les esters d'acridine (NSP-SA-NHS) CAS : 199293-83-9 et les composés apparentés se sont avérés être des marqueurs chimiluminescents très avantageux, avec une stabilité, une activité et une sensibilité dépassant celles des isotopes radioactifs. Dans des conditions alcalines, le NHS partira et l'ester d'acridine se liera à la protéine avec une liaison amide stable pour former un composé acridine. Une fois la réaction terminée, l'excès de sel d'acridine est éliminé à travers une colonne de dessalage. En présence de peroxyde d'hydrogène alcalin, la protéine marquée à l'acridine ne nécessite pas de catalyse enzymatique pour émettre de la lumière par elle-même. Après avoir ajouté le réactif d'excitation, le système libère immédiatement des photons, qui peuvent être détectés avec un photomètre standard de 430 nm. Ce processus d'émission de lumière est très court (l'ensemble du processus se déroule en moins de 2 secondes), et le schéma de déclenchement doit ajouter un photomètre interne et un détecteur de photons. Les protéines, les peptides, les anticorps et les acides nucléiques peuvent tous être marqués à l'acridine. Le composé marqué émet de la lumière rapidement sous l'excitation du peroxyde d'hydrogène basique, et le composé marqué peut être détecté en collectant des photons.
Stabilité du produit :
- Il est stable en solution acide (pH 4,8, en particulier en solution alcaline, le composé acridine est partiellement hydrolysé pour réduire sa stabilité, et le processus d'hydrolyse est un processus de réaction sombre qui n'émet pas de lumière ; le degré d'hydrolyse augmente avec l'augmentation du pH, et le degré d'hydrolyse augmente avec l'augmentation de la température.
- La stabilité de l'amide d'acridine est supérieure à celle de la structure d'ester d'acridine, et la capacité à résister à l'hydrolyse est plus forte.
- Le cycle acridine ou le cycle phénol ou le cycle benzène sulfonyle sont liés à un groupe méthyle et à d'autres groupes donneurs d'électricité. En raison de l'encombrement stérique important, la stabilité thermique est augmentée ; le groupe électroattracteur est attaché, ce qui est bénéfique pour la réaction de substitution nucléophile Sa stabilité diminue.
- Suggestion : Utilisez un tampon faiblement acide autant que possible pour le tampon de stockage après le couplage, et barbotez de l'azote pour éliminer l'oxygène. A conserver à basse température, scellé et à l'abri de la lumière. Les conditions peuvent être transformées en échantillons lyophilisés puis stockés.
Précautions: - Le processus de luminescence de l'ester d'acridinium est très court (l'ensemble du processus prend moins de 2 secondes) et le schéma de déclenchement doit ajouter un photomètre interne et un détecteur de photons ; en outre, ce produit peut également utiliser un lecteur de microplaques multifonctionnel équipé d'un passeur d'échantillons Effectuer la collecte de données de luminescence pour minimiser l'influence du temps d'ajout de l'échantillon sur le signal collecté.
